簡要描述:外泌體濃縮液是一款適用于大體積外泌體樣本的高效濃縮試劑,能快速處理大體積樣本。濃縮后的樣本可用于后續(xù)的外泌體分離純化、RNA 提取、蛋白提取等實驗。
產(chǎn)品分類
Product Category詳細介紹
品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號 | AC25L141 |
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規(guī)格 | 50mL、100mL | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
外泌體濃縮液是一款適用于大體積外泌體樣本的高效濃縮試劑,能快速處理大體積樣本。濃縮后的樣本可用于后續(xù)的外泌體分離純化、RNA 提取、蛋白提取等實驗。
本產(chǎn)品主要用于尿液和細胞培養(yǎng)上清中的外泌體濃縮,但濃縮后的外泌體不適合直接進行 NTA 粒徑分析、Western Blot、qPCR、NGS 測序、外泌體標記或蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析等。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
外泌體濃縮液 | AC25L141 | 50mL |
外泌體濃縮液 | AC25L142 | 100mL |
運輸與保存
常溫運輸。4℃保存,有效期12個月。
使用方法
自備儀器、試劑與耗材:高速冷凍離心機、50mL離心管、無菌PBS。
1. 樣品預處理
(1) 去除細胞:對含細胞樣品,4℃,300g,離心 5min,將上清轉(zhuǎn)移至新離心管;無細胞樣品可跳過此步驟。
(2) 去除細胞及細胞碎片:4℃,2,000g,離心10min,將上清轉(zhuǎn)移至新離心管。
(3) 去除大體積顆粒:將步驟(2)獲得的上清液在4℃,14,000g,離心 30min,取上清轉(zhuǎn)移至新離心管?;蜻x擇替代方法:將步驟(2)的上清液通過 0.2μm 微孔濾膜過濾,收集濾液。
2. 大體積外泌體樣本濃縮
(1) 將預處理后的樣品24mL加入50mL離心管,加入6mL外泌體濃縮液,上下顛倒充分混勻。注:樣本體積與外泌體濃縮液的比例為4:1,可按此比例調(diào)整樣本體積。為保證效果,推薦濃縮樣本體積不少于24mL。
(2) 室溫孵育60 min(快速流程);如時間允許,推薦在 4℃ 過夜孵育(高回收流程)。
(3) 在4℃、12,000g 離心 30min,棄去上清。小心吸棄或倒出上清后,用200μL移液器盡量吸凈殘余上清。
3. 外泌體樣本重懸
(1) 向沉淀中加入適量無菌 PBS,用移液器輕柔上下吹打,充分混勻。注:無菌PBS的加入體積可靈活調(diào)整,但濃縮倍數(shù)不建議超過 50倍,推薦濃縮24-30倍。若將本試劑盒用于外泌體分離,按細胞培養(yǎng)上清/尿液樣本10mL,加入100μL無菌PBS進行重懸。
(2) 待外泌體樣本溶解后,可用于外泌體分離純化、RNA 提取、蛋白提取等后續(xù)實驗。注:如不立即進行后續(xù)實驗,可將溶解后的樣本置于-80℃保存(若24h內(nèi)進行實驗,可4℃保存)。如進行外泌體分離純化,可選擇沉淀法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號:AC15L412) ,SEC法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號:AC25L434) ,或磁珠法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號:AC25L422) 或 (貨號:AC25L423)。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 使用過程中,盡量在無菌環(huán)境開啟瓶蓋,減少對試劑的污染。
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本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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