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說一說細(xì)胞培養(yǎng)的灌流培養(yǎng)工藝

更新時(shí)間:2021-04-16      點(diǎn)擊次數(shù):2495
      隨著生物技術(shù)藥物在人類疾病診治和預(yù)防中的廣泛應(yīng)用,大大加速了動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)品大規(guī)模高效培養(yǎng)的產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程。目前動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)已成為生物制藥領(lǐng)域最重要的關(guān)鍵技術(shù)之一,并以其研究的深入和進(jìn)展推動(dòng)了生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展。近年來,蛋白質(zhì)類藥物的上市和帶來的巨大經(jīng)濟(jì)效益,掀起了哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的熱潮。對于倍增時(shí)間長、對外界環(huán)境敏感、培養(yǎng)難度大的動(dòng)物細(xì)胞,如何完善其培養(yǎng)工藝,提高細(xì)胞蛋白表達(dá)量,并有效投入大規(guī)模生產(chǎn),成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。
  灌流培養(yǎng)工藝是細(xì)胞培養(yǎng)一種常用的發(fā)酵工藝,多采用攪拌式細(xì)胞發(fā)酵系統(tǒng),也可采用管式系統(tǒng)。在發(fā)酵過程中,不斷向發(fā)酵罐灌流培養(yǎng)液,同時(shí)以相同流量流出。灌流工藝的優(yōu)點(diǎn)是可在發(fā)酵過程中不斷去除細(xì)胞碎片和副產(chǎn)物,降低細(xì)胞死亡后釋放的各種酶類可能對產(chǎn)物的影響。同時(shí),由于連續(xù)不斷的灌流新鮮培養(yǎng)液而提供一個(gè)較恒定的培養(yǎng)環(huán)境,因此可獲得較高的單位體積產(chǎn)率。由于灌流系統(tǒng)多采用細(xì)胞截留與回收系統(tǒng),因而可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度發(fā)酵。
  目前,對于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法選取,主要決定于細(xì)胞生長的特性和目的蛋白的性質(zhì)。灌流培養(yǎng)的顯著優(yōu)勢在于蛋白可以隨著培養(yǎng)基及時(shí)地被分離出,蛋白在反應(yīng)器內(nèi)停留時(shí)間短,較少受到培養(yǎng)體系內(nèi)各種水解酶的降解作用,有利于蛋白質(zhì)量的提高。這一特點(diǎn),對于化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白,例如酶、凝血因子等生產(chǎn)極為有利。而當(dāng)細(xì)胞生長和蛋白質(zhì)量不受培養(yǎng)方式限制時(shí),例如對于化學(xué)性質(zhì)相對穩(wěn)定的抗體等藥物生產(chǎn)而言,是選擇細(xì)胞灌流培養(yǎng)還是補(bǔ)料批次培養(yǎng),需綜合衡量成本、效益、規(guī)模、風(fēng)險(xiǎn)、操作靈活性等因素。
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