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Quick Cell支原體去除/預(yù)防試劑盒使用說明書

發(fā)布時間:2017/11/16      點擊次數(shù):1971

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Quick Cell支原體去除/預(yù)防試劑盒

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Quick Cell支原體去除/預(yù)防試劑盒

C4056L1066

2ml

-20 ℃

1200

 

產(chǎn)品簡介

支原體(Mycoplasma)是一種沒有細胞壁的原核生物,大小約0.1 - 0.6微米。目前,已發(fā)現(xiàn)的支原體品種有100多種。 由于支原體直徑較小,經(jīng)??梢源┻^實驗室常規(guī)的0.20微米孔徑的除菌濾膜,高壓過濾時,甚至可以穿過0.10微米孔徑的除菌濾膜,造成細胞的支原體污染。本公司開發(fā)的支原體清除試劑Ⅰ含有抑制支原體蛋白質(zhì)合成的藥物,而支原體清除試劑Ⅱ含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機理不同,支原體清除試劑Ⅰ需要處理不少于15天,而支原體清除試劑Ⅱ只需處理7天。兩者都可以達到*殺滅和清除支原體的目的。大約5-10%的支原體會對Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ或Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ產(chǎn)生抗性,此外,也有3-5%左右的細胞會在殺滅支原體的過程中死亡,由于上述兩個原因,我們一般建議同時購買兩種支原體清除試劑,如果發(fā)現(xiàn)細胞被污染,可以將細胞分成兩份,分別用Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ同時進行殺滅,這樣支原體對兩種藥物同時產(chǎn)生抗性和處理過程中細胞同時死亡的概率會非常低。

試劑盒組成

       Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ              1.0 mL (1000×)

       Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ              1.0 mL (1000×)

運輸和儲存

      常溫運輸,-20 ℃保存,可以保存2年。

使用方法

(一)Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ

1. 使用之前,先將Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ用PBS或者無血清培養(yǎng)液稀釋10倍后,放4℃冰箱保存。

2. 將50-100萬個細胞鋪到60 mm的細胞培養(yǎng)皿內(nèi),加入4 mL含Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ的正常細胞培養(yǎng)液(使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ,按1:100比例加入)。

3. 每2-3天更換細胞培養(yǎng)液,加入新鮮的含Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ的正常細胞培養(yǎng)液。期間如果細胞密度過大,請保持細胞密度適當(dāng)(貼壁細胞可能需要胰酶消化),并更換新的培養(yǎng)皿。

4. 處理15天后,可以用支原體檢測試劑盒進行檢測,檢測支原體是否殺滅*。如果仍有支原體殘留,可以考慮再處理6天。

5. 以后每隔1個月進行支原體的常規(guī)檢測,以保證沒有新的支原體污染。

(二)Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ

1. 使用之前,先將Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ(注意:支原體清除試劑Ⅱ在-20 ℃保存后,解凍時可能會有細小的結(jié)晶析出)用PBS或者無血清培養(yǎng)液稀釋10倍后,(支原體清除試劑Ⅱ可以*溶解,放4℃冰箱保存。

2. 將50-100萬個細胞鋪到60 mm的細胞培養(yǎng)皿內(nèi),加入4 mL含Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ的正常細胞培養(yǎng)液(使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ,按1:100比例加入)。

3. 每天更換細胞培養(yǎng)液,加入新鮮的含Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ的正常細胞培養(yǎng)液。期間如果細胞密度過大,請保持細胞密度適當(dāng)(貼壁細胞可能需要胰酶消化),并更換新的培養(yǎng)皿。

4. 處理7天后,可以用支原體檢測試劑盒進行檢測,檢測支原體是否殺滅*。如果仍有支原體殘留,可以考慮再處理3天。

5. 以后每隔1個月進行支原體的常規(guī)檢測,以保證沒有新的支原體污染。

注意事項

      1. 建議將細胞分成兩份,分別用Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ同時進行殺滅,這樣支原體對兩種藥物同時產(chǎn)生抗性和處理過程中細胞同時死亡的概率會非常低。如果單獨使用一種清除試劑的話,萬一發(fā)現(xiàn)細胞對其中一種清除試劑有抗性或者細胞在處理過程中死亡,又要再花7-15天的時間嘗試另外一種清除試劑的效果。

      2. 處理過程中,注意每天觀察細胞的狀況,如果發(fā)現(xiàn)支原體清除試劑對細胞的毒性較大,可以加大培養(yǎng)液中的血清濃度或者提高細胞的密度。

      3. Quick Cell支原體清除試劑Ⅰ和Quick Cell支原體清除試劑Ⅱ在降低濃度后(使用稀釋10倍后的Quick Cell支原體支原體清除試劑Ⅰ或者Ⅱ,按1:500比例加入)也可以加入到培養(yǎng)液中作為短期(1-2個月)的支原體污染預(yù)防藥物,但是不建議在細胞培養(yǎng)液中長期(超過2個月)加入,因為有可能導(dǎo)致對該兩種藥物有抗性的支原體出現(xiàn)。

 

 

Quick Cell支原體清除試劑的效果圖:左側(cè)為未經(jīng)支原體清除試劑處理的人Hela細胞,經(jīng)DAPI染色后,除了細胞核為藍色外,細胞質(zhì)也有大量的絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色,這些處于細胞質(zhì)的核酸物質(zhì)就是支原體DNA。而右側(cè)為經(jīng)過本公司的支原體清除試劑Ⅱ處理7天的Hela細胞,經(jīng)DAPI染色后,除了細胞核為藍色外,細胞質(zhì)沒有任何絮狀核酸物質(zhì)被染成藍色,說明支原體已經(jīng)被清除。

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

保存

價格(元)

Quick Cell支原體快速檢測試劑盒(細胞培養(yǎng))

C4056L1060

50 T

-20℃

1250

Quick Cell 發(fā)光法支原體檢測試劑盒

C4056L1062

50 T

-20℃

1250

Quick Cell PCR法支原體檢測試劑盒

C4056L1064

100 T

-20℃

1350

Quick Cell支原體去除/預(yù)防試劑盒

C4056L1066

2ml

-20℃

1200

 

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