国产亚洲精品97在线视频一,2021国产精品视频,日韩欧美一区二区三区高清,国产av亚洲一区二区

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁 > 資料下載 > 蛋白酶K 使用說明書

蛋白酶K 使用說明書

發(fā)布時間:2017/11/14      點(diǎn)擊次數(shù):1877

文件下載    圖片下載    

蛋白酶K

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

保存

價格(元)

蛋白酶K

D1009L1161

1 g

-20 ℃

1350

產(chǎn)品簡介

蛋白酶K(Proteinase K),相對分子量約為29.3 kDa, 是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,應(yīng)用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn),蛋白酶K的一般工作濃度是50—100µg /ml。因蛋白酶K在變性劑如SDS(1%)中可提高其活性,所以在使用中,常根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。蛋白酶K在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。

蛋白酶K有兩個Ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去Ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染核酸制品的蛋白質(zhì)。所以,蛋白酶k消化過程中通常也加入EDTA(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對蛋白酶k具有較強(qiáng)耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/l Ca2+而不含EDTA的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合Ca2+。

運(yùn)輸和儲存

      冰袋運(yùn)輸,-20 ℃保存,可以保存12個月。避免反復(fù)凍融。

使用方法

      1. 配制蛋白酶K溶液:一般以20mg/ml濃度配制蛋白酶K溶液。將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml dd水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。

      2. 根據(jù)終濃度50—100µg /ml,吸取適量蛋白酶K溶液,到待消化樣品中,孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

注意事項(xiàng)

蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的樣品處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,能增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會,提高雜交信號。但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問題,并能達(dá)到理想的染色效果。

常用蛋白酶作用位點(diǎn)

蛋白酶

分類

作用位點(diǎn)

已知抑制物

氨基肽酶

金屬蛋白酶

帶有自由氨基的L-氨基酸氨基末端;不能分解由X-Pro、D或Q組成的肽鍵

2,2-雙吡啶,1-(1)-菲咯啉

菠蘿蛋白酶

巰基蛋白酶

無特異性

α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化

羧肽酶A

鋅金屬蛋白酶

帶有自由氨基酸的L-氨基酸羧基端;不能分解R、P或羥脯氨酸

EDTA,EGTA

羧肽酶B

鋅金屬蛋白酶

K,R羧基端

EDTA,EGTA,堿性氨基酸

羧肽酶Y

絲氨酸羧肽酶

氨基酸羧基端

PMSF

組織蛋白酶C

琉基蛋白酶

氨基端雙肽,可通過K,R或P氨基端作為第二或第三個氨基酸封閉

醋酸碘,  甲醛

胰凝乳蛋白酶

絲氨酸蛋白酶

在F,T或Y之后

抑肽酶,PMSF,TPCK,α—巨球蛋白

膠原酶

金屬蛋白酶

在P-X-G-P肽鏈中X之后

EDTA,EGTA,還原劑,但無血清存在

dispase

金屬蛋白酶

無特異性

EDTA,EGTA,Hg2+,重金屬

內(nèi)肽酶Arg-C

絲氨酸蛋白酶

在R之后

α巨球蛋白,TLCK

內(nèi)肽酶Asp-N

金屬蛋白酶

在D和半胱氨酸之前

EDTA,α菲咯啉

內(nèi)肽酶Glu-C

絲氨酸蛋白酶

在E或D之后

α巨球蛋白,TLCK

內(nèi)肽酶Lys-C

絲氨酸蛋白酶

在K之后

TLCK,抑肽酶,抑蛋白酶醛肽

腸激酶

絲氨酸蛋白酶

在D-D-D-D-K-肽鏈中K之后

 

Xa因子

絲氨酸蛋白酶

在R之后

PMSF,APMSF,大豆胰蛋白酶抑制物

無花果蛋白酶

琉基蛋白酶

無特異性

TPCK,TLCK,α-巨球蛋白

激肽釋放酶

絲氨酸蛋白酶

在一些R之后

抑肽酶,抑蛋白酶醛肽

木瓜蛋白酶

巰基蛋白酶

長期孵育時具有廣泛特異性

TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α—巨球蛋白,烷化劑

胃蛋白酶

酸蛋白酶

廣泛特異性

胃蛋白酶抑制素

纖溶酶

絲氨酸蛋白酶

在K或R之后

PMSF,TLCK,抑肽酶,α—巨球蛋白

鏈霉蛋白酶

混合型

無特異性

B.M.完整藥片

蛋白酶K

絲氨酸蛋白酶

廣泛特異性

PMSF,PefablocSc

枯草桿菌蛋白酶

絲氨酸蛋白酶

無特異性

PMSF,α巨球蛋白,苯甲脒

熱溶素

鋅金屬蛋白酶

在非極性殘基之前

EDTA

凝血酶

絲氨酸蛋白酶

在K之后

TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽

抑肽酶,α巨球蛋白,苯甲脒

胰蛋白酶

絲氨酸蛋白酶

在K或R之后

TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽

抑肽酶,α巨球蛋白

微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
四虎成人在线免费视频-亚洲熟女中文字幕天堂| 亚洲女人黄色录像一区-日韩av电影在线免费看| 婷婷六月视频在线观看-久久亚洲综合国产精品| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 国产精品二区高清在线-91精品91久久久久久| 亚洲av乱码一区二区-九九免费在线观看视频| 亚洲产国偷v产偷v自拍性色av-亚洲欧美日韩国产三区| 国产成人精品免费视频大全办公室-亚洲欧美日本综合在线| 中文字幕亚洲综合久久最新-久久精品视频免费久久久| 国产成人高清精品免费5388-好妞色妞在线视频播放| 亚洲另类熟女国产精品-懂色一区二区三区在线播放| 性激烈欧美三级在线播放-久久中文字幕人妻少妇| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 亚洲另类自拍唯美另类-99国产精品兔免久久| 国产欧美日韩中文字幕在线-国产伊人一区二区三区四区| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 婷婷综合在线视频观看-亚洲一区二区三区香蕉| 韩漫一区二区在线观看-精品国产免费未成女一区二区三区| 日韩精品亚洲不卡一区二区-成人网在线视频精品一区二区三区| 日韩国产一区二区三区在线-精品日韩人妻少妇av| 丝袜高跟熟女视频国产-熟女少妇亚洲一区二区| 一区二区三区国产高清mm-美女张开腿让帅哥桶爽| 黑丝av少妇精品久久久久久久-中文字幕久久久人妻无码| 哦啊好大用力欧美视频-麻豆国产传媒片在线观看| 亚洲av成人一区国产精品网-国产偷_久久一级精品a免费| 午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 男女做爰猛烈啪啪吃奶在线观看-人妻连裤丝袜中文字幕| 日韩亚洲一区二区三区av-欧美综合在线观看一区二区三区| 四虎成人在线免费视频-亚洲熟女中文字幕天堂| 日韩高清在线观看一区二区-美产av在线免费观看| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 欧美一级二级三级在线看-日韩精品欧美嫩草久久99| 亚洲综合久久综合激情-日韩欧美精品人妻二区少妇| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 日韩毛片在线免费人视频-超碰中文字幕av在线| 欧洲精品一区二区三区中文字幕-91久久国产综合久久蜜月精品| 日韩av电影一区二区网址-老熟妇仑乱视频一区二| 中文字幕社区电影成人-欧美精美视频一区二区三区|